Содержание
|
Меристемная культураПривет! Давайте делиться опытом по меристемной культуре орхов. Кто что сажал (тип экспланта), на какую среду (гормоны, концентрация), сколько росло и что получилось. Сейчас посадил гибридный фленопс (куски цветоноса с почками и без) на MS БАП 3мг/л стерилизация смесью спирт 96%:H2O2 30%:H2O = 1:1:1 в течение пяти минут. Посмотрим, что получится. Это уже обсуждалось, попробуйте через Рамблер сделать поиск только на этом сайте. Практически все форумы (кроме архива по фаленопсисам) проиндексированы. Я смотрю этот форум почти со времен основания, но не помню, чтобы это обсуждалось конкретно. Сделайте поиск по меристема. Что-то найдется. И в фаленопсисисах было про активизация спяших почекна цветоносах. Привет! Скажи по-конкретнее что тебя интересует. Введение в культуру или размножение. Если размножение, то в принципе практически все виды орхов прекрасно растут на MS безгормоналке. Если ты вводишь в культуру фалик кусками цветоноса обрати внимание на условия культивирования. Там, если мне не изменяет память, большую роль играет температура культивирования. Посмотри книгу Черевченко Т.М. "Орхидеи в культуре" там все подробно описано. С меристемным размножением пытался разобраться - в Рунете ничего нет, кроме пары статей по картофелю. Корее, всего, если кто и владеет этой технологией - вряд ли поделится опытом. Лично я хотел бы попробовать, если бы имел информацию, хотя-бы в общих чертах. Вот ссылка на документ по теме - www.ssu.runnet.ru/faculties/ biological/departments/biology/docs/1.doc Есть много информации в старых книгах об орхидеях. Лучше всего описано у Черевченко, но еще лучше в ее монографии на ту же тему. Ну, если в библиотеке ничего не найдешь, а без меристемы просто жить не можешь, кинь на почту вебмастера адрес, отксерокопирую соответствующие страницы и бандеролью или заказным письмом пришлю. Если интересно, то есть ссылки по этой теме: 1. Arditti J.Clonal propagation of orchids by means of tissue culture.-In: Orchids biology: Reviews and perspectives. Ithaca, London: Cornell univ.press, 1977, p 310. 2. Koch L. Erbgleiche Vermehrung von Phalaenopsis in vitro.- Gartenwelt, 1974, 22,s.482-488. 3. Rao A. Tissue culture in orchid industry.- In: Plant cell Tissue and Organ culture. New York: Springer, 1977, p.44-96. 4. Tanaka M., Sakanishi G. Clonal propagation of Phalaenopsis by leaf tissue culture.- Amer.Orchid Soc.Bull., 1977, 46, n 8 , p. 733- 737 Если интересно - есть 4 статьи на английском непосредственно по микроклоналке, достаточно свежие. Мой e-mail указан - могу выслать pdf. 01. Chen J.-T., Chang W.-Ch. “Effects of tissue culture conditions and explant characteristics on direct somatic embryogenesis in Oncidium ‘Gower Ramsey’”// Plant Cell, Tissue and Organ Culture, 2002, vol 69, pp 41-44,. 02. Chang C., Chang W.C. “Plant regeneration from callus culture of Cymbidium ensifolium var. misericors” //Plant Cell Reports, 1998, vol 17, pp 251-255 03. Chen J.T., Chang C., Chang W.C. “Direct somatic embryogenesis on leaf explants of Oncidium Gower Ramsey and subsequent plant regeneration”// Plant Cell Reports, 1999, vol 19, pp 143-149 04. Ishii Y., Takamura T., Goi M., Tanaka M. “Callus induction and somatic embryogenesis of Phalaenopsis”// Plant Cell Reports, 1998, vol 17, pp 446-450 Литературу можно поискать и на англоязычных сайтах:www.pubmed.com или www.scirus.com Если статья за деньги, практически всегда есть corresponding author. Можно написать непосредственно ему спросьбой выслать статью. Достаточно часто народ откликается. Мне, вот, на днях бандероль из Бельгии пришла. Прислали 12 ксерокопий (не по орхидным, правда). Так что выход есть всегда Интересно, какие результаты у Глеба? У меня чешутся руки проделать нечто подобно, благо среду MS и все остальное уже собрал. Есть два кандидата на клонирование - кончики корней фаленопсиса и тоже, но филодендрона. Буду благодарен всем советчикам. Пока не могу подобрать оптимальные условия стерилизации. Все либо зарастает, либо дохнет от слишком жесткого воздействия. Пришел к выводу, что нужно стерилизовать не перекисью и спиртом, а доместосом или асом (там есть ClO(-) анионы) По крайней мере их используют для стерилизации семян арабидопсиса. Попробуйте при введении почками на цветоносах и кусочками корня различные концентрации БАП. От 0,1 до 1 мг/л. Посмотри, это по твоей теме http://senpolia.tskm.ru/publication/place/10_11_02_smurela/tissue1.shtml На самом деле, в спирте предварительно можно не замачивать:http://senpolia.tskm.ru/publication/place/10_11_02_smurela/tissue1.shtml Это делается для лучшей смачиваемости поверхности экспланта. Вместо него в раствор стерилизующего вещества можно добавлять Tween 60. Можно использовать, если эксплант при стерилизации сильно "обгарает". На первом этапе стерилизации мы стерилизовали в 0,4% фунгициде. Хорошие результаты дает Дитан. Он "убивает" не только грибы, но и бактерии. Моя коллега использовала его при стерилизации голубики - очень довольна. |